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Natamycin ist seit Jahrzehnten in der Lebensmittelindustrie als Hürde für Pilz-Auswuchs in Milchprodukten und anderen Lebensmitteln verwendet worden. Mögliche Vorteile für die Verwendung von Natamycin könnten der Ersatz herkömmlicher chemischer Konservierungsmittel, ein neutraler Geschmackseinfluss und eine geringere Abhängigkeit von dem pH-Wert für die Wirksamkeit sein, wie dies bei chemischen Konservierungsmitteln üblich ist. Es kann in vielfältiger Weise angewendet werden: als wäßrige Suspension (wie z. B. in eine Sole gemischt), die auf das Produkt aufgesprüht wird, oder in das das Produkt eingetaucht wird, oder in Pulverform (zusammen mit einem Antibackmittel wie Cellulose) aufgespritzt wird Oder gemischt in das Produkt. Obwohl derzeit nicht zugelassen für den Einsatz auf Fleisch in den Vereinigten Staaten, lassen einige Länder Natamycin auf die Oberfläche von trockenen und fermentierten Würsten angewendet werden, um Schimmelbildung auf dem Gehäuse zu verhindern. Auch ist Natamycin für verschiedene Milchprodukte in den Vereinigten Staaten zugelassen. Insbesondere wird Natamycin gewöhnlich in Produkten wie Hüttenkäse, Sauerrahm, Joghurt, zerkleinerten Käsesorten, Käsescheiben und verpackten Salatmischungen verwendet. Einer der Gründe für Nahrungsmittelproduzenten, Natamycin zu verwenden, ist, die künstliche konservierende Sorbinsäure zu ersetzen.
Als Lebensmittelzusatzstoff hat er die E-Nummer E235. In der gesamten Europäischen Union ist es nur als Oberflächenschutzmittel für bestimmte Käse- und Trockenwurstprodukte zugelassen. Sie darf 5 mm unterhalb der Rinde nicht nachweisbar sein. Während Natatycin in verschiedenen Anwendungen auf verschiedenen Ebenen der Welt zugelassen ist, ist es in über 150 Ländern weltweit zugelassen.
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