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Milchsäure wird hauptsächlich in Sauermilchprodukten wie Koumiss, Laban, Joghurt, Kefir, einigen Hüttenkäsen und Kombucha gefunden. Das Casein in fermentierter Milch wird durch Milchsäure koaguliert (geronnen). Milchsäure ist auch für den sauren Geschmack von Sauerteigbrot verantwortlich.
Bei der Weinbereitung wird oft ein bakterielles Verfahren, natürlich oder kontrolliert, verwendet, um die natürlich vorhandene Apfelsäure in Milchsäure umzuwandeln, die Schärfe zu reduzieren und aus anderen geschmacklichen Gründen zu reduzieren. Diese malolaktische Fermentation wird von der Familie der Milchsäurebakterien durchgeführt.
Als Lebensmittelzusatzstoff ist er für den Einsatz in der EU, in den USA und in Australien und Neuseeland zugelassen und unter der INS-Nummer 270 oder E-Nummer E270 gelistet. Milchsäure wird als Nahrungsmittelkonservierungsmittel, Härtungsmittel und Geschmacksmittel verwendet. Es ist ein Bestandteil in verarbeiteten Lebensmitteln und wird als Dekontaminationsmittel während der Fleischverarbeitung verwendet. Milchsäure wird kommerziell durch Fermentation von Kohlenhydraten wie Glukose, Saccharose oder Lactose oder durch chemische Synthese hergestellt. Kohlenhydratquellen schließen Mais, Rüben und Rohrzucker ein .
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